TOXOPLASMA GONDII: PRODUÇÃO DE IFN- E TNF- DESENCADEADAS PELA IMUNIZAÇÃO COM PROTEÍNAS EXCRETADAS/SECRETADAS (ESA) DE TAQUIZOÍTOS EM CAMUNDONGOS AS/n

Thais Alves da Costa Silva, Monamaris Marques Borges, Vera Lucia Pereira-Chioccola

Resumo


Das principais células envolvidas neste controle de resposta imune são as fagocíticas, incluindo células dendríticas e macrófagos teciduais. Citocinas como IFNγ e TNFα são fundamentais para ativar os mecanismos que controlam várias infecções dentre elas Toxoplasmose. Estas citocinas ativam macrófagos estimulando a atividade anti-T.gondii, importante na resistência do hospedeiro. O presente estudo analisou a contribuição das proteínas excretadas/secretadas (ESA) por taquizoítos quanto a capacidade de estimular a resposta imune celular de hospedeiros imunizados e infectados com T.gondii. Os experimentos utilizaram linfócitos do baço de camundongos AS/n distribuídos em três grupos: A-. imunizados com 4 doses semanais de ESA associado ao ALUM (adjuvante), B- crônicos (infectados com a cepa ME-49) e C- animais controles que receberam somente ALUM. Linfócitos obtidos de macerado do baço foram estimulados in vitro com ESA ou antígeno lisado de taquizoítos (ALT) nas concentrações finais de 0,5; 1,0; 5,0 e 25 μg/mL. Como controles positivo da produção de IFNγ os linfócitos foram estimulados com ConA (2ug/ml) ou para TNFα usamos LPS (2ug/ml). As concentrações de IFNγ e TNFα nos sobrenatantes das culturas foram estimadas por ELISA, 72 ou 20 horas pós estímulo, respectivamente. Os dados obtidos mostraram que linfócitos dos camundongos imunizados e re-estimulados com ESA não produziram IFNγ ou TNFα, enquanto as células dos animais crônicos sintetizaram apenas IFNγ. Quando os linfócitos dos grupos imunizados ou crônicos foram estimulados com ALT, ambos produziram IFNγ e TNFα. Esplenócitos dos camundongos controles não sintetizaram IFNγ nem TNFα em resposta a ambos antígenos.Estes dados sugerem que os antígenos ESA e o ALT diferem na sua capacidade de estimular a resposta imune, podendo ativar diferentemente clones de linfócitos T e macrófagos, uma vez que esplenócitos dos animais imunizados responderam aos antígenos presentes no lisado (ALT) de modo semelhante ao obtido com os animais crônicos. Este mecanismo está sendo investigado.

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